Evaluation of programmed cell death processes on the lens epithelium of older dogs with diabetic and hypermature cataracts / Avaliação dos processos de morte celular programada no epitélio da lente de cães idosos com catarata diabética e hipermadura

It is well known that posterior capsule opacification (PCO), one of the most common late postoperative complications of cataract surgery, is mainly caused by proliferation and differentiation of remaining lens epithelial cells (LECs) on the posterior lens capsule. Many authors suggest that alterations induced by the pathophysiology of cataracts, its metabolism and the use of 0.1% trypan blue (TB) must cause some degree of cellular damage on these cells, wicht would help to prevent and/or reduce the incidence of PCO after cataract surgery in humans. Therefore, the aim of this study was to evaluate the expression of cell death markers on LECs of older dogs with diabetic and hypermature cataracts, after capsulorhexis, both using 0.1% TB. Twenty samples collected from 13 dogs of different breeds, with ages varying from 8 to 12 years-old, with diabetic and hypermature cataracts, which had been subjected to phacoemulsification surgery (Phaco) using 0.1% TB for staining were studied. Animals were classified as dogs with diabetic (DC) and hypermature cataracts (HC), and expression of molecular markers for apoptosis and autophagy (caspase-3 and beclin-1) on LECs were obtained by immunofluorescence technique. The expression of caspase-3 and beclin-1 was observed in every studied sample and did not differ between groups. In conclusion, our findings suggest that apoptosis and autophagy processes occur to LECs in older dogs presenting diabetic and hypermature cataracts after Phaco utilizing 0.1% TB. Our results may be helpful to future studies of PCO in post-phacoemulsification surgery patients.(AU)

A opacificação da cápsula posterior da lente do globo ocular é a complicação mais observada após a remoção da lente. Essa patologia é causada principalmente pela proliferação e diferenciação das células do epitélio anterior da lente em sua cápsula posterior. Muitos autores sugerem que alterações induzidas pelo metabolismo e/ou patofisiologia da catarata e o uso do corante de azul de tripan a 0,1% devam causar algum dano a essas células, o que supostamente ajudaria a prevenir e reduzir a incidência de tal complicação em humanos. Este trabalho avaliou a expressão de marcadores de morte celular no epitélio anterior da lente de cães idosos com catarata diabética e hipermadura, após capsulorrexe realizada com o emprego do azul de tripan a 0,1%. Foram estudadas vinte amostras colhidas de treze cães de diferentes raças, com idades variando de oito a doze anos, que apresentavam catarata diabética ou hipermadura e que foram submetidos à facoemulsificação utilizando corante de azul de tripan a 0,1%. Foram designados dois grupos: com catarata diabética (DC) e com catarata hipermadura (HC). A expressão molecular dos marcadores de morte celular por apoptose a autofagia (caspase-3 e beclina-1) no epitélio anterior da lente foi avaliada pela técnica de imunofluorescência. Observou-se que a expressão de caspase-3 e beclina-1 ocorreu em todas as amostras e não foi diferente entre os grupos. Os achados deste estudo sugerem que o processo de morte celular por apoptose e autofagia ocorre no epitélio anterior da lente de cães idosos com catarata diabética e hipermadura submetidos à facoemulsificação com o corante de azul de tripan a 0,1%. Este resultado pode ser útil para estudos futuros da opacidade da cápsula posterior da lente em cães submetidos à facoemulsificação.(AU)

Transplante de membrana amniótica na ceratopatia bolhosa / Amniotic membrane transplantation for bullous keratopathy

OBJETIVOS: Avaliar o efeito do transplante de membrana amniótica no alívio da dor e melhora dos defeitos epiteliais recorrentes em portadores de ceratopatia bolhosa assintomática e pobre potencial visual. MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo com 9 pacientes, no período compreendido entre abril/2000 e dezembro/2001 no Serviço de Oftalmologia do Hospital Universitário Evangélico de Curitiba - HUEC. Pré-operatoriamente, a história médica de cada paciente foi avaliada e exame oftalmológico completo foi realizado. Os pacientes foram avaliados com freqüência maior ou igual a uma vez por semana, incluindo o 1º pós-operatório (PO), 7º PO, 14º PO e 30º PO dia. Avaliação mensal foi realizada até o 6º mês pós-operatório. RESULTADOS: A amostra foi composta por 3 (33,3 por cento) pacientes do sexo masculino e 6 (66,6 por cento) pacientes do sexo feminino, com idade entre 29 e 74 anos. Todos os pacientes apresentavam dor ocular, 7 (77,7 por cento) apresentavam lacrimejamento, 8 (88,8 por cento) pacientes queixavam-se de fotofobia e 4 (44,4 por cento) apresentavam olho vermelho. A acuidade visual no pré-operatório era conta dedos em 6 (66,6 por cento) pacientes, movimento de mãos em 2 (22,2 por cento) pacientes e amaurose em 1 (11,1 por cento) paciente. Após o procedimento, observou-se reepitelização de todos os pacientes entre o 12º e 21º dia pós-operatório. Os pacientes apresentaram melhora da dor e fotofobia após a 1ª semana do transplante de membrana amniótica e permaneceram assintomáticos até o final do seguimento. CONCLUSAO: A membrana amniótica tem potencial para restaurar a superfície corneana em pacientes com ceratopatia bolhosa sintomática, reduzindo a dor desses pacientes em pouco tempo. Contudo, o número de pacientes avaliados é pequeno e o seguimento curto, mas essa terapêutica é uma alternativa que tem nos encorajado, assim como a outros pesquisadores, devido ao excelente resultado obtido.

Influência do uso tópico de proparacaína na reparaçäo de defeito epitelial corneano / Effects of proparacaine on re-epithelization of the cornea

O uso de tópico de soluçöes anestésicas é frequentemente associado a efeitos tóxicos ao epitélio corneano. Por outro lado, seu uso tem sido proposto em algumas situaçöes, especialmente após a ceratectomia fotorrefrativa (PRK), um procedimento que envolve desepitelizaçäo corneana e que tem um período pós-operatório bastante doloroso. Objetivo: Avaliar a influência do uso tópico de proparacaína nas concentraçöes a 0,05 por cento e a 0,5 por cento e de tampäo fosfato (controle) na reparaçäo do defeito epitelial corneano central. Métodos: Um defeito de 6,0mm de diâmetro foi realizado na córnea de uma populaçäo de coelhos. Os colírios contendo os anestésicos e o tampäo fosfato instilados, uma gota a cada 30 minutos, durante 12 horas, por 2 dias. A avaliaçäo da cicatrizaçäo de defeito epitelial foi feita com fotografias seriadas da área sem epitélio, corada com fluoresceína sódica e medida com auxílio de analisador de imagem computadorizado. Resultados: A cicatrizaçäo corneana näo apresentou diferença estatística entre os grupos comparados durante o estudo. A proparacaína nas diferentes concentraçöes näo induziu alteraçöes histopatológicas tais como: descontinuidade do epitélio, desorganizaçäo das camadas de colágeno ou presença de um infiltrado inflamatório intenso (o edema estrômico e o infiltrado inflamatório na regiäo límbica foram discretos). Conclusäo: O uso tópico de proparacaína näo a reepitelizaçäo do defeito epitelial e näo foi responsável pelo aparecimento de alteraçöes histopatológicas importantes.

Regeneraçäo do epitélio corneano central após o uso tópico de mitomicina C / Regeneration of central corneal epithelium after the topical use of mitomycin C

OBJETIVO: Avaliar se o uso de mitomicina C, em olhos submetidos a uma ressecçäo conjuntival, deixando-se a esclera nua, influencia na reparaçäo de defeitos epiteliais corneanos realizados imediatamente após a suspensäo da droga. MATERIAL E MÉTODOS: Vinte e uma coelhas, aleatoriamente divididas em três lotes de 7 animais, foram submetidas a ressecçäo de retalho conjuntival temporal justalímbico de 5mm de extensäo por 3 mm de largura, deixando-se a esclera exposta. Doze horas após este ato cirúrgico iniciou-se a instilaçäo de colírios de mitomicina C a 0,02 por cento (14 olhos), a 0,04 por cento (14 olhos) e soluçäo de cloreto de sódio a 0,90 por cento (14v olhos controles) 2 gotas, 2 vezes ao dia, por 5 dias. Doze horas depois da última instilaçäo dos colírios, realizou-se um defeito epitelial corneano central de 7,75 mm de diâmetro. A avaliaçäo qualitativa do epitélio regenerado foi avaliada com exames biomicroscópicos e a quantitativa foi realizada a partir de fotografias seriadas. Ao final do experimento 4 olhos medicados com cada uma das concentraçöes da droga e 8 olhos controles foram enucleados e suas córneas examinadas por histopatologia (coloraçäo com HE) e imuno-histoquímica (PCNA). RESULTADOS: Durtante a instilaçäo de colírios observou-se hiperemia conjuntival em 28,57 por cento dos olhos que utilizaram mitomicina C a 0,02 por cento, em 35,71 por cento dos olhos que utilizaram a medicaçäo a 0,04 por cento e em nenhum dos olhos-controle. Na avaliaçäo realizada em 20 horas os olhos medicados com mitomicina C apresentaram pior qualidade do epitélio regenerado em relaçäo aos olhos-controle. Näo houve diferença significativa entre os valores dos coeficientes angulares médios das retas de cicatrizaçäo, obtidos dos olhos submetidos aos diferentes tratamentos. Os achados histopatológicos e imuno-histoquímicos (PCNA) foram semelhantes nas córneas dos olhos-controle e medicados. Observou-se 3 a 4 camadas de células epiteliais, atipia celular discreta e 100 por cento de coloraçäo para o PCNA das células epiteliais basais e uma célula por campo de grande aumento nas camadas epiteliais superiores. No estroma notou-se faixa estreita de homogeneizaçäo de colágeno e presença de infiltrado inflamatório linfomononuclear discreto no centro das córneas. CONCLUSÖES: Os resultados desta investigaçäo, nas condiçöes deste estudo, mostraram que o uso prévio de colírio de mitomicina C em olhos com esclera nua näo influenciou na reparaçäo de defeitos epiteliais...